Conţinut
Analiza reacției în lanț a polimerazei (PCR) este o tehnică de laborator. Scopul testării PCR este de a găsi cantități mici de ADN într-o probă, utilizând un proces cunoscut sub numele de amplificare. În timpul amplificării PCR, ADN-ul de interes este copiat în mod repetat până când este suficient din acesta pentru analiză și detectare. De exemplu, PCR poate fi utilizat pentru a identifica cantități mici de ADN din organismele care provoacă gonoree sau chlamydia care sunt prezente într-o probă de urină.Cum funcționează PCR?
Primul pas al PCR este crearea grunduri. Acestea sunt secvențe scurte de ADN care se potrivesc până la capetele probei de ADN pe care încercați să o detectați. Ele sunt trucul pentru a găsi, amplifica și detecta o anumită bucată de ADN. Această bucată de ADN poate fi utilizată pentru a identifica un agent patogen. Poate fi folosit și pentru a face lucruri precum detectarea genelor pentru rezistența la antibiotice.
Odată ce aveți primerii, următorul pas în PCR este încălzirea probei, astfel încât ADN-ul cu catenă dublă să se separe în două catene simple - acest lucru se numește denaturare. Apoi grundelesunt combinate cu proba ADN. După aceasta, un ADN polimeraza este utilizat pentru a începe replicarea ADN-ului la locația primerului. În cele din urmă, ADN-ul este încălzit pentru a separa încă o dată firele. Cu aceasta, întregul proces PCR începe din nou.
Cantitatea segmentului de interes ADN prezent în eșantion crește exponențial cu fiecare ciclu PCR. În primul ciclu, o copie devine două. Apoi, două copii devin patru, apoi devin opt etc. Această creștere exponențială înseamnă că, în general, sunt necesare doar 20 până la 40 de cicluri pentru a determina dacă ADN-ul în cauză este prezent. (Dacă ADN-ul este prezent, 20-40 de cicluri sunt de asemenea suficiente pentru a furniza o probă suficientă pentru analiză).
Toate etapele unei reacții în lanț a polimerazei - denaturarea ADN-ului, aplicarea primerilor și alungirea ADN-ului se întâmplă la temperaturi diferite. Asta înseamnă că după ce amestecul inițial este asamblat, etapele pot fi controlate printr-un proces cunoscut sub numele de termociclism. Termociclarea înseamnă că temperatura este menținută la nivelurile necesare suficient de mult timp pentru a avea loc fiecare pas. Astfel, PCR este un mod eficient de a amplifica cantitatea de ADN țintă. De fapt, acesta poate fi realizat într-o singură eprubetă cu puțină nevoie de intervenție umană.
Reacția în lanț a polimerazelor a reprezentat o revoluție în tehnica biologică atunci când a fost dezvoltată pentru prima dată la începutul anilor 1980. Creatorul PCR, Kary Mullis, a câștigat Premiul Nobel pentru chimie pentru munca sa în 1993.
De ce PCR este relevant pentru testarea STD
Reacția în lanț a polimerazei și tehnici conexe, cum ar fi reacție în lanț ligază, se dovedesc a avea o importanță crescândă pentru testarea STD, deoarece aceste tehnici pot identifica direct cantități mici de ADN sau ARN viral în probe. Identificarea codului genetic al unui agent patogen nu necesită ca agentul patogen să fie viu, spre deosebire de cultura bacteriană sau cultura virală. De asemenea, nu este nevoie ca infecția să se fi produs cu suficient timp în urmă pentru ca oamenii să aibă o reacție detectabilă de anticorpi (modul în care infecțiile sunt detectate de ELISA.) Aceasta înseamnă că tehnicile PCR pot detecta uneori bolile mai devreme decât alte teste. Chiar mai bine, boli cu transmitere sexuală pot fi detectate fără a fi nevoie să vă îngrijorați de păstrarea probelor în viață sau de testarea exactă la momentul potrivit.
Cele mai bune teste STD la domiciliu